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病理論壇在線咨詢異丙醇替代二甲苯在快速脫水程序中的應用
異丙醇替代二甲苯在快速脫水程序中的應用
薛曉偉 李星奇 王德田 鐘定榮
中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)院病理科
摘自：2014年02期《診斷病理學雜志》
病理標本送至病理科，經(jīng)過常規(guī)脫水染色程序后，才能進行診斷，這個過程往往需要3 ~5天。隨著小標本的數(shù)量增加，該脫水程序已不適合臨床對病理報告發(fā)放時間的要求。本文探討使用異丙醇替代二甲苯作為組織透明劑，應用于小標本的快速脫水。
1.材料與方法
1.1 材料
選取北京協(xié)和醫(yī)院7月臨床送檢的結腸等20 余例手術大標本。全自動封閉式脫水機peloris II 2臺，染色試劑為GS環(huán)保型染色套液，其它試劑為國產(chǎn)分析純，石蠟 LEICA (58℃ ~60℃）。
1.2 方法
送檢的大組織病理標本，經(jīng)病理醫(yī)師模擬結腸鏡在每份標本的相同部位鉗取2份，隨機分為1h組和常規(guī) 組。1 h脫水程序:4%甲酸1 min， 85%乙醇1 min和6 min (55℃)，乙醇/異丙醇混合液(4:1) 1 min和6 min (55℃ )，異丙醇 1 min X2，異丙醇 12 min (55℃)，石蠟 20 min 和 5 min (85℃)，石蠟1 min (65℃)。常規(guī)脫水程序（略）。程序完成 后，分別進行石蠟包埋，3 ~4 μm切片，GS環(huán)保型試劑HE染 色，GC-)2封片膠封固。
2.結果
2.1 兩組蠟塊質(zhì)量比較
經(jīng)多次實驗驗證，經(jīng)1 h脫水程 序的小組織透明效果較好，硬度適中，蠟塊容易切出3 ~4 μm切片，切片完整無裂痕。與傳統(tǒng)試劑長時間脫水程序無明顯差別。
2.2 染色效果比較
經(jīng)1h脫水程序制作的切片，HE染色后切片組織完整，厚薄均勻，核漿分明，符合優(yōu)良片的標準 (圖 1，2)。
圖1為1h程序 圖2為常規(guī)程序
3.討論
病理科使用的透明劑二甲苯，因其價格低廉、透明效果好，常規(guī)應用于脫水和染色程序中。但是，二甲苯對************系統(tǒng)具有慢性毒性作用。近年來，多種二甲苯的替代劑相繼出現(xiàn)，本實驗中采用異丙醇作為快速脫水程序中的透明劑使用，采用GS環(huán)保型染色套液進行染色，取得了較好的效果。由于異丙醇處理組織過程中的重要作用是軟化組織，且對組織收縮作用較大，為避免組織由無水乙醇入 異丙醇造成的組織驟縮，本次實驗特別設計了省去無水乙醇，采用兩步乙醇/異丙醇4: 1混合液的方法。結果證明，組織沒有出現(xiàn)明顯的驟縮。同時，在HE染色過程中使用GS 環(huán)保型試劑，取得良好的制片效果，說明GS環(huán)保型試劑可以應用于快速脫水處理的切片染色中。
總之，異丙醇作為透明劑應用于快速脫水程序中是可行的，GS環(huán)保型試劑適用于快速脫水的組織切片染色，染色質(zhì)量優(yōu)良?？焖倜撍绦虿粌H能夠病理標本的個性化處理，減少患者病理報告等待時間，更重要的是對病理從業(yè)人員的二
甲苯接觸危害大大降低了。但是，經(jīng)過異丙醇透明的快速脫水后的標本，特殊染色和免疫組化的質(zhì)量如何，是我們下一步實驗所要探討的重點。
參考文獻
[1] 王德田，董建強，梁志勇.實用現(xiàn)代病理學技術[M].北京： 北京協(xié)和醫(yī)科大學出版社，2012:61 -62.
[2] 龍建洲.異丙醇替代二甲苯在組織透明中的應用[J].檢驗 醫(yī)學與臨床，2010:2(7) :161 -162.
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