環(huán)保試劑與傳統(tǒng)試劑冷凍制片效果的比較

環(huán)保試劑與傳統(tǒng)試劑冷凍制片效果的比較

薛曉偉  王德田  李星奇  鐘定榮

中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)院病理科

摘自：2013年第08期《診斷病理學(xué)雜志》

在日常手術(shù)快速病理工作中，尋找一種安全有效的環(huán)保試劑替代傳統(tǒng)試劑有重要的意義。本文就GS試劑與傳統(tǒng)試劑染色效果和診斷價(jià)值進(jìn)行比較。

1. 材料與方法

 1.1材料

取自協(xié)和醫(yī)院手術(shù)快速冷凍標(biāo)本，每種標(biāo)本各制做2套切片。GS冷凍病理切片染色套液（哈爾濱格林標(biāo)本技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司）、丙酮、乙醇、二甲苯均為國(guó)產(chǎn)分析純；徠卡CM3050冷凍切片機(jī)和徠卡OCT包埋劑。

 1.2方法

切取新鮮子宮平滑肌瘤、結(jié)節(jié)性甲狀腺腫和乳 腺纖維腺瘤標(biāo)本，置于冷凍臺(tái)上，組織周?chē)渭?/span>OCT，冷凍2 ~5 min，待組織塊變硬后，使用CM3050S冷凍切片機(jī)制作厚 度在5 ~7 μm的冷凍切片2套。

  1.2.1傳統(tǒng)試劑

切片入丙酮固定后，依次進(jìn)入蘇木精，分化，返藍(lán)，伊紅，梯度乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹(shù)膠封固。

  1.2.2環(huán)保試劑

切片入GS固定液，依次入GS蘇木精、 分化、藍(lán)化、伊紅，梯度乙醇，GS除浮染液、除水透明和透明 液，GC~02封片膠封固。

2. 結(jié)果

采用環(huán)保試劑制備的快速病理切片，固定效果較好，染液滲透力強(qiáng)，組織結(jié)構(gòu)清晰，核漿分明，色彩鮮艷，脫水透明效果較好，在子宮平滑肌瘤、結(jié)節(jié)性甲狀腺腫、乳腺纖維腺瘤3種組織中的染色效果與傳統(tǒng)試劑無(wú)明顯差異（圖1 ~3)。

3. 討論

冷凍切片廣泛應(yīng)用于手術(shù)中的快速病理診斷。冷凍切片質(zhì)量好壞是診斷正確與否的重要因素。

完成冷凍切片后需要進(jìn)行固定，以防止組織與載玻片分離或懸浮。一旦冷凍制片的任何環(huán)節(jié)發(fā)生脫片，需要重新制作，嚴(yán)重影響術(shù)中快速病理的診斷速度和質(zhì)量。固定的另一作用是把蛋白質(zhì)、酶、糖等沉淀或凝固成不溶性物質(zhì)，保持組織細(xì)胞與正常生活時(shí)的形態(tài)相似。傳統(tǒng)的冷凍切片固定劑為丙酮、AF液和乙醇等，丙酮屬于高危險(xiǎn)性化學(xué)試劑， 有刺激性氣味，而GS固定液無(wú)色、無(wú)味，符合國(guó)家環(huán)保標(biāo) 準(zhǔn)，是丙酮的良好替代品。

一張優(yōu)良的冷凍切片要求用時(shí)短，切片質(zhì)量好，染色鮮艷，鏡下組織結(jié)構(gòu)清楚，細(xì)胞形態(tài)清晰，胞質(zhì)分明，無(wú)脫片和冰晶現(xiàn)象出現(xiàn)，術(shù)后冷凍石蠟診斷符合率高。二甲苯因 其價(jià)格低廉，透明效果好，是常規(guī)應(yīng)用的透明試劑。但是，二 甲苯對(duì)************系統(tǒng)有慢性毒性作用，而使用格林環(huán)保試 劑，透明完全，沒(méi)有白霧現(xiàn)象，且鏡下觀核漿分明，無(wú)色素沉

圖1子宮平滑肌瘤，A為傳統(tǒng)試劑，B為環(huán)保試劑

圖2 結(jié)節(jié)性甲狀腺腫，A為傳統(tǒng)試劑，B為環(huán)保試劑

圖3 乳腺纖維腺瘤，A為傳統(tǒng)試劑，B為環(huán)保試劑 渣出現(xiàn)，符合優(yōu)良冷凍制片的標(biāo)準(zhǔn)。

綜上所述，環(huán)保試劑在病理常規(guī)制片以及免疫組化的應(yīng)用價(jià)值國(guó)內(nèi)外均有文獻(xiàn)報(bào)道，格林標(biāo)本環(huán)保試劑，能夠制作出優(yōu)良的冷凍切片，對(duì)于子宮平滑肌瘤、結(jié)節(jié)性甲狀腺 腫、乳腺纖維腺瘤的診斷價(jià)值與傳統(tǒng)試劑沒(méi)有差異。

 

參考文獻(xiàn)

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