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病理論壇在線咨詢環(huán)保試劑及超聲組織處理儀在乳腺癌粗針穿刺中的應(yīng)用
環(huán)保試劑及超聲組織處理儀在乳腺癌粗針穿刺中的應(yīng)用
趙潔 付海洋 王成勤
青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院 病理學(xué)教研室
摘自：2013年01期《診斷病理學(xué)雜志》
常規(guī)乙醇一二甲苯制片法加上免疫組化染色往往需要1周時(shí)間，本文采用GS組織處理套液，利用超聲組織處理儀處理粗針穿刺乳腺標(biāo)本，不僅大大縮短了診斷時(shí)間，且不影 響免疫組化染色效果，其方法如下。
1.材料與方法
1.1材料
青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院2011-10—2012-4間送檢的乳腺粗針穿刺標(biāo)本167例。GS組織樣本制備套液及 GS病理切片染色套液由哈爾濱格林標(biāo)本技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司提供；鈞鎰JYCL-2型超聲處理儀由山東鼎成醫(yī)療設(shè)備科技有限公司提供；Boond-nax型全自動(dòng)免疫組化染色機(jī)由德國(guó) 徠卡公司提供。免疫組化—抗為北京中杉金橋生物有限公司提供，檢測(cè)系統(tǒng)為德國(guó)徠卡公司提供的Boond-nax專利的Compact polymer(緊湊型聚合物）檢測(cè)技術(shù)。
1.2方法
用超聲組織處理儀先將乳腺穿刺標(biāo)本經(jīng)4%中性緩沖甲醛前固定15 min，再用GS固定液45℃：固定10 min，GS環(huán)保型脫水試劑I、II及透明試劑50 ℃各處理15 min；62 ℃：浸蠟20 min；常規(guī)石蠟包埋、切片。GS組織樣本染色套液行HE、免疫組化染色均設(shè)外部陽(yáng)性對(duì)照。
2. 結(jié)果
用GS組織樣本制備套液制作的蠟塊，切片軟硬適宜，厚薄均勻，尤其是帶脂肪的組織，切片完整。HE染色鏡下觀察組織結(jié)構(gòu)清晰，紅藍(lán)對(duì)比分明；免疫組化染色無(wú)背景著色，結(jié)果與傳統(tǒng)方法無(wú)明顯差異（圖1 ~3)。
圖1 乳腺癌，HE染色
圖2乳腺癌，ER(+) EnVision法
圖3乳腺癌，c-；rBb~2 ( + ) EnVision法
3.討論
傳統(tǒng)制作標(biāo)本的方法具有高毒性，易揮發(fā)等缺點(diǎn)，而環(huán)保型的GS組織樣本制備套液及GS病理切片染色套液，均為非苯類******型復(fù)合試劑，可替代二甲苯對(duì)組織的脫水及透明。
乳腺穿刺標(biāo)本用GS環(huán)保型無(wú)醛固定液直接固定標(biāo)本，HE染色時(shí)無(wú)明顯差異，但免疫組化染色時(shí)背景著色較重，這可能與GS環(huán)保型無(wú)醛固定液是以醇類為主體的復(fù)合固定液 有關(guān)；根據(jù)ASCO/CAP乳腺癌指南中規(guī)定乳腺標(biāo)本必須經(jīng) 4%中性緩沖甲醛固定的原則3 ，在使用環(huán)保試劑之前本文采用4%中性緩沖甲醛在常溫下應(yīng)用超聲波對(duì)穿刺標(biāo)本進(jìn)行了前固定，取得滿意效果，在HER2檢測(cè)上尤為明顯，167例標(biāo)本中HER2 (卅）為31例，其中7例經(jīng)CISH、FISH檢測(cè)為HER2擴(kuò)增，符合率均達(dá)100%。
環(huán)保型超聲處理儀有4個(gè)操作缸，缸內(nèi)容量500ml， 可同時(shí)處理40余個(gè)標(biāo)本，帶有定時(shí)啟動(dòng)停止功能，溫度可調(diào)。處理乳腺穿刺標(biāo)本時(shí)應(yīng)注意:①由于超聲波的作用可產(chǎn)生一定的溫度，一定要確保實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)，將設(shè)備放置在通風(fēng)柜內(nèi)；②脫水時(shí)因需加溫處理，試劑會(huì)蒸發(fā)，所以要及時(shí)觀察補(bǔ)充脫水缸中的試劑，總體要求500個(gè)標(biāo)本徹底更換一次液體。
總之，應(yīng)用GS環(huán)保型試劑可減少試劑對(duì)實(shí)驗(yàn)室的污染， 而應(yīng)用環(huán)保型超聲標(biāo)本處理儀處理標(biāo)本2天即可得到免疫組化結(jié)果。此方法在無(wú)冷凍切片機(jī)的基層單位也可應(yīng)用于臨床快速病理診斷。
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