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綠色環(huán)保無醛固定液與傳統(tǒng)甲醛固定液的區(qū)別

綠色環(huán)保無醛固定液與傳統(tǒng)甲醛固定液的區(qū)別

 

中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)院  李冬梅  孫麗萍**  王德田  羅玉鳳*

    關(guān)鍵詞  綠色  環(huán)保固定   甲醛固定  區(qū)別


實驗?zāi)康?/b>:通過GS無醛固定液與甲醛固定液的對比試驗,驗證GS環(huán)保試劑對組織形態(tài)、抗原性、RNA/DNA的保存能力。

實驗材料:我院病理科病人活檢及手術(shù)標(biāo)本,乳腺癌、結(jié)腸癌、肺癌、卵巢癌、淋巴瘤五種組織,共12例樣本。

實驗方法:每例標(biāo)本(未經(jīng)固定的新鮮標(biāo)本),各取12塊大小基本相同的實質(zhì)性腫瘤組織,分別裝入10%中福爾馬林和GS無醛固定液中固定,并分別固定后1天(指24小時)、3天、7天、15天、30天、60天進行脫水包埋(其中無醛固定液固定的用GS系列脫水劑脫水)。待全部標(biāo)本制備完成后,統(tǒng)一切片并同時進行HE染色和免疫組化試驗。

    乳腺癌:ER、PRC-erb-B2、Her-2基因熒光原位分子雜交

    結(jié)腸癌:CA199、P53

    肺癌:EGFR、Ki67

    卵巢癌:CA125

    淋巴瘤:LCA、CD20CD45RO

    關(guān)于Her-2基因熒光原位分子雜交檢測說明:Her-2基因熒光原位分子雜交可以先做C-erb-B2染色,選擇2例中1C-erb-B2+++++陽性的標(biāo)本做FISH即可,具體做法可以首先選擇固定1天及60天的兩個時間點的兩種固定方式同時做免疫組化實驗,如60天時間點FISH檢測陽性,則其他時間點可以不做。如60天時間點為FISH陰性,則應(yīng)繼續(xù)做固定30天時間點,依次類推直至做到FISH陽性的時間點。

腫瘤類型

實驗編號

Her-2

ER

PR

 

 

 

 

乳腺癌

RA1

RB1

0

0

+++

++

+++

+++

RA2

RB2

0

0

+++

++

+++

+++

RA3

RB3

0

0

+++

++

0

0

RA4

RB4

切片未見CA組織,不做參考

                A組:傳統(tǒng)甲醛固定組織                                               B:GS無醛固定組織


固定時肉眼觀察:RA組液面渾濁,組織上浮。RB組液面清亮,組織變白變硬,有沉底現(xiàn)象。

    HE染色:GS無醛固定液HE染色核漿對比度鮮明,胞漿染色偏紅,其他與傳統(tǒng)甲醛固定無明顯區(qū)別。免疫組織化學(xué)染色:ER、PR染色,GS無醛固定液RB組細胞核著色整體略淡,染色對比度差,其它各項染色強度高于傳統(tǒng)試劑甲醛固定RA組。

討論:傳統(tǒng)甲醛固定液對組織滲透力強、固定均勻,組織收縮小,成本低。但它易揮發(fā),具有較強烈的刺激性和高劇毒性。隨著人們環(huán)保意識的提高,我們病理工作者都渴望建立有環(huán)保型的實驗室,減少甲醛、二甲苯等有毒液體在我們?nèi)粘9ぷ髦袑ι眢w的危害。尋求一種******無害的環(huán)保試劑來代替甲醛、二甲苯是國內(nèi)外病理技術(shù)工作者的又一新的跨越性目標(biāo)。我們希望看到新型環(huán)保試劑的產(chǎn)生,它能做到⑴無色、無刺激性、低揮發(fā)、不含甲醛等任何醛類化合物,易生物降解。⑵能夠保持良好的組織形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)。⑶有較強固定、脫水、脫脂兼硬化作用。⑷能保護組織中抗原和核酸不被破壞、降解等特點。早日為我們病理技術(shù)工作者實現(xiàn)綠色、環(huán)保實驗室的夢想!

    作者  郵編100730       江西省婦幼保健院



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添加時間:2016-04-12 點擊量:1292